ال ChAdTS من فيروس غدي يصيب الشمبانزي بالنمط المصلي 68 ( AdC68 ) بحزف E1 لإدخال التسلسل الترميزي لبروتين سبايك بتحسين الكودون لزيادة إنتاج البروتين ليكون ChAdTS-S او لإدخال التسلسل الترميزي ل RBD باليتيد الإشعاري الاصلي من S protein ليكون ChAdTS-RBD او لإدخال التسلسل الترميزي ل RBD ب secretory signal peptide من Mouse IgG ليكون ChAdTS-RBDs وكذلك بحزف E3 حيث لا يوجد الجين الذي يسمح للفيروس بالتكاثر وبحزف E4 بشكل جزئي لإدخال المناظر لها بالفيروس الغدي الذي يصيب الإنسان بالنمط المصلي 5 .
- خمسة فئران إناث BALB/c بعمر 6 أسابيع تلقي كل منها ChAdTS-S حيث 10^10 جزيئات فيروسية بالحقن بالعضل وخمسة فئران اخري تلقي كل منها نفس الجرعة لكن عبر الانف وخمسة فئران اخري تلقي كل منها 10^9 جزيئات فيروسية ChAdTS-S بالحقن بالعضل وخمسة اخري تلقي كل منها نفس الجرعة لكن بالانف وخمسة فئران أخري تلقي كل منها 10^8 جزيئات فيروسية ChAdTS-S بالحقن بالعضل وخمسة فئران اخري تلقوا نفس الجرعة لكن بالأنف تم جمع الأمصال كل أسبوعين حتي الاسبوع 8 من التحصين وحدث رد مناعي خلطي قوي بإنتاج الأجسام المضادة المستدامة والإرتباط ب RBD ونشاط التحييد ضد SARS-CoV-2 بالنمط الكاذب أصبح قابل للكشف بعد أسبوعين من التحصين ومتوسط إجمالي الإرتباط ب ID50 هو 6286.0 للفئران التي تلقت ChAdTS-S عبر الانف و 8585.4 للفئران التي تلقت ChAdTS-S بالحقن بالعضل ومتوسط التحييد ب ID50 عند الفئران التي تلقت الجرعة الاعلي هو 1508.5 للفئران التي تلقت ChAdTS-S عبر الانف و 1253.9 للفئران التي تلقت ChAdTS-S بالحقن بالعضل .
- خمسة فئران BALB/c تلقي كل منها ChAdTS-RBD حيث 10^10 جزيئات فيروسية بالحقن بالعضل وخمسة فئران اخري تلقي كل منها نفس الجرعة لكن عبر الانف وخمسة فئران اخري تلقي كل منها 10^9 جزيئات فيروسية ChAdTS-RBD بالحقن بالعضل وخمسة اخري تلقي كل منها نفس الجرعة لكن بالانف وخمسة فئران أخري تلقي كل منها 10^8 جزيئات فيروسية ChAdTS-RBD بالحقن بالعضل وخمسة فئران اخري تلقوا نفس الجرعة لكن بالأنف وتم جمع الأمصال كل أسبوعين حتي الاسبوع 8 من التحصين وحدث رد مناعي خلطي قوي بإنتاج الأجسام المضادة المستدامة والإرتباط ب RBD ونشاط التحييد ضد SARS-CoV-2 بالنمط الكاذب أصبح قابل للكشف بعد أسبوعين من التحصين ومتوسط إجمالي الإرتباط ب ID50 هو 6515.4 للفئران التي تلقت ChAdTS-RBD عبر الانف و 7384.2 للفئران التي تلقت ChAdTS-RBD بالحقن بالعضل ومتوسط التحييد ب ID50 عند الفئران التي تلقت الجرعة الاعلي هو 187.5 للفئران التي تلقت ChAdTS-RBD عبر الانف و 172.5 للفئران التي تلقت ChAdTS-RBD بالحقن بالعضل .
- خمسة فئران BALB/c تلقي كل منها ChAdTS-RBDs حيث 10^10 جزيئات فيروسية بالحقن بالعضل وخمسة فئران اخري تلقوا نفس الجرعة لكن عبر الانف وخمسة فئران اخري تلقي كل منها 10^9 جزيئات فيروسية ChAdTS-RBDs بالحقن بالعضل وخمسة اخري تلقي كل منها نفس الجرعة لكن بالانف وخمسة فئران أخري تلقي كل منها 10^8 جزيئات فيروسية ChAdTS-RBDs بالحقن بالعضل وخمسة فئران اخري تلقي كل منها نفس الجرعة لكن بالأنف وتم جمع الأمصال كل أسبوعين حتي الاسبوع 8 من التحصين وحدث رد مناعي خلطي قوي بإنتاج الأجسام المضادة المستدامة والإرتباط ب RBD ونشاط التحييد ضد SARS-CoV-2 بالنمط الكاذب أصبح قابل للكشف بعد أسبوعين من التحصين ومتوسط إجمالي الإرتباط ب ID50 هو 3527.2 للفئران التي تلقت ChAdTS-RBDs عبر الانف و 3948.5 للفئران التي تلقت ChAdTS-RBDs بالحقن بالعضل ومتوسط التحييد ب ID50 عند الفئران التي تلقت الجرعة الاعلي هو 165.2 للفئران التي تلقت ChAdTS-RBDs عبر الانف و 115.0 للفئران التي تلقت ChAdTS-RBDs بالحقن بالعضل.
- خمسة فئران BALB/c تلقي كل منها ChAdTS الناقل فقط حيث 10^10 جزيئات فيروسية بالحقن بالعضل وخمسة فئران اخري تلقوا نفس الجرعة لكن عبر الانف وخمسة فئران اخري تلقي كل منها 10^9 جزيئات فيروسية ChAdTS بالحقن بالعضل وخمسة اخري تلقي كل منها نفس الجرعة لكن بالانف وخمسة فئران أخري تلقي كل منها 10^8 جزيئات فيروسية ChAdTS بالحقن بالعضل وخمسة فئران اخري تلقي كل منها نفس الجرعة لكن بالأنف وتم جمع الأمصال كل أسبوعين حتي الاسبوع 8 من التحصين وإنجزاب الأجسام المضادة ل RBD ونشاط التحييد كان غير قابل للكشف .
* بملاحظة إنتاج الاجسام المضادة المرتبطة والمحايدة بفئران BALB/c يظهر تفوق ChAdTS-S وسرعة خلق الأجسام المضادة المحايدة وحجمها يظهر تفوق التحصين عبر الانف عن الحقن العضلي .
- تماشيا مع ما تم إكتشافه بمقايسة تحييد الفيروس بالنمط الكاذب كان نشاط التحييد ضد SARS-CoV-2 الحي من مصل فئران BALB/c قابل للإكتشاف بعد أسبوعين من التحصين ب ChAdTS-S حيث 10^10 جزيئات فيروسية وب FRNT ID50 هو 2260.1 مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S عبر الانف و 957.3 مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S بالحقن العضلي ونشاط التحييد غير قابل للكشف مع الفئران التي تلقت ChAdTS الناقل فقط ومع فقط الفئران التي تلقت اللقاح عبر الانف ظهر إفراز IgA المرتبط ببروتين S trimer باللعاب و في الاسبوع 8 بعد التحصين كان IgG المرتبط ببروتين S trimer ب ED50 وصل إلي 19869.4 مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S عبر الانف وطوال فترة الدراسة كان بالغالب IgG1 ووصل إلي 23058 مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S بالحقن العضلي وطوال فترة الدراسة كان بالغالب هو IgG2a ونسب IgG2a/IgG1 بالمتوسط أقل من 1 مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S عبر الانف وأكثر من 1 مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S بالحقن العضلي وحيث إلي 2.8 بالاسبوع 8 بعد التحصين .
- تم قياس SFCs ل IFN-γ وحيث كان هناك عدد كبير حيث 593 SFU لكل 10^6 من الخلايا الطحالية بعد التحفيز ب overlapping peptide pool من S protein مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S بالحقن بالعضل ومع فئران التي تلقت ChAdTS-S عبر الانف كان 89 SFU لكل 10^6 من الخلايا الطحالية لكن كان 33 SFU لكل 10^6 من الخلايا الطحالية مع الفئران التي تلقت الناقل ChAdTS فقط فالرد متحيز ل Th1 عند تلقي ChAdTS-S فقط بالحقن العضلي وما يدعم ذلك عدد الخلايا التائية +CD4 و +CD8 التي تنتج IFN-γ و TNF-α و IL-2 بمقايسة ICS مع إنتاج IgG2a اكثر من IgG1 .
- خمسة فئران تلقي كل منها ChAdTS-S حيث 10^10 جزيئات فيروسية بالحقن العضلي وبيقابلها خمسة فئران تلقت ChAdTS حيث 10^10 جزيئات فيروسية بالحقن العضلي وخمسة فئران تلقي كل منها ChAdTS-S حيث 10^10 جزيئات فيروسية عبر الانف و بيقابلها خمسة فئران تلقي كل منها ChAdTS حيث 10^10 جزيئات فيروسية عبر الانف وكان بيتم جمع عينات الدم كل أسبوعين ولم يحدث تناقص واضح للأجسام المضادة المرتبط ب S trimer ولا حتي بتحييد الفيروس بالنمط الكاذب حتي الاسبوع 36 بعد التحصين ب ChAdTS-S .
أثنين من المكاك الريسوسي يتلقي كل منهم ChAdTS-S حيث 10^11 جزيئات فيروسية بالحقن العضلي وبيقابلها أثنين من المكاك الريسوسي يتلقي كل منهم ChAdTS حيث 10^11 جزيئات فيروسية بالحقن العضلي وتم جمع عينات الدم كل أسبوعين وحيث مع المكاك الذي تلقي ChAdTS-S بالحقن العضلي كانت الأجسام المضادة IgA لبروتين S trimer بعينات المصل غير قابلة للكشف لكن تم إكتشاف IgG لبروتين S trimer او RBD من جميع عينات المصل وفي الأسبوع الثاني بعد التطعيم تم إكتشاف الأجسام المضادة المحايدة ل live SARS-CoV-2 وبالنمط الكاذب وحتي الأسبوع 8 بعد التطعيم عيارات الأجسام المضادة ظلت ثابتة نسبيا وتم إكتشاف بعد التطعيم أجسام مضادة محايدة للناقل ChAdTS لكن قدرة الأجسام المضادة علي منع الفيروس الغدي ضعيفة والسيتوكينات IFNγ و IL-2 فقط قابلة للإكتشاف بالاسبوع الثاني بعد التطعيم والتي تفرزها خلايا Th1 وبالاسبوع 4 لوحظ حدوث إنخفاض شديد وبالأسبوع 8 بعد التحصين أخذ المكاك 10^6 PFU من live SARS-CoV-2 في الرغامي وتم جمع عينات من الانف باليوم 0 و 1 و 2 و 3 و 5 و 7 بعد التحدي الفيروسي وحيث باليوم 2 بعد التحدي كانت كمية نسخ gRNA الفيروسي و sgRNA الذي يشير إلي تكاثر الفيروس يمكن إكتشافها مع 1 من 2 المكاك التي تلقت ChAdTS-S لكن بعدها كانت غير قابلة للكشف وحيث بيتم الفياس ب Droplet Digital PCR الادق من RT-PCR وحيث COVID-19 digital PCR detection kit من شركة Targeting One ببكين الذي يسمح لإكتشاف جين ORF1ab بحد كشف لكل إختبار 3 نسخ وجين N بحد كشف لكل إختبار 5 نسخ و باليوم 8 تم القتل الرحيم للمكاك والحمل الفيروسي غير قابل للكشف بانسجة الرئة لكن الحمل الفيروسي مرتفع بالمكاك الذي تلقي الناقل فقط ChAdTS اي العدوي الفيروسية شديدة وما يؤكد ذلك الفحص المجهري حيث لوحظ ان الاثنين المكاك التي تلقت ChAdTS هي فقط من إصيبت بالإتهاب الرئوي الخلالي الحاد بكل فصوص الرئة .
أثنين من المكاك يتلقي كل منهم ChAdTS-S حيث 10^11 جزيئات فيروسية عبر الأنف وبيقابلها أثنين من المكاك الريسوسي يتلقي كل منهم ChAdTS حيث 10^11 جزيئات فيروسية عبر الأنف وتم جمع عينات الدم كل أسبوعين وحيث مع المكاك الذي تلقي ChAdTS-S عبر الانف تم إكتشاف الأجسام المضادة IgA لبروتين S trimer بعينات المصل وعيارات الأجسام المضادة IgG لبروتين S trimer او RBD كانت اعلي من تلك الموجودة مع المكاك الذي تلقي ChAdTS-S بالحقن العضلي بجانب ان انتاج الأجسام المضادة تم بشكل أسرع وكانت الأجسام المضادة المحايدة ل live SARS-CoV-2 وبالنمط الكاذب قابلة للكشف في الاسبوع الثاني من التطعيم والقدرة علي منع الفيروس كانت اعلي وتم إنتاج الأجسام المضادة المحايدة بشكل أسرع لكن في الاسبوع الرابع لوحظ حدوث إنخفاض كبير وقدرة الأجسام المضادة للناقل ChAdTS علي منع الفيروس الغدي أقل عن ماهي عليه مع المكاك الذي تلقي ChAdTS-S بالحقن العضلي وتم إفراز كمية كبيرة من السيتوكين IL-6 و IL-8 وحيث قابلة للكشف بالاسبوع الثاني بعد التطعيم وبالاسبوع 4 لوحظ حدوث إنخفاض شديد في السيتوكين IL-8 لكن حدث زيادة في السيتوكين IL-6 وبالأسبوع 4 بعد التحصين أخذ المكاك 10^6 PFU من live SARS-CoV-2 في الرغامي وتم جمع عينات من الأنف باليوم 0 و 1 و 2 و 3 و 5 و 7 بعد التحدي الفيروسي وحيث باليوم 1 بعد التحدي كانت كمية نسخ gRNA الفيروسي و sgRNA الذي يشير إلي تكاثر الفيروس يمكن إكتشافها مع 1 من 2 المكاك التي تلقت ChAdTS-S لكن حدث بعدها تناقص تدريجي وكمية نسخ gRNA كانت أعلي بكثير من sgRNA فبدءا من اليوم 3-7 لم يكشف عن أي نسخ sgRNA وباليوم 7 تم القتل الرحيم للمكاك والحمل الفيروسي غير قابل للكشف بانسجة الرئة لكن الحمل الفيروسي مرتفع بالمكاك الذي تلقي الناقل فقط ChAdTS اي العدوي الفيروسية شديدة وما يؤكد ذلك الفحص المجهري حيث لوحظ ان الاثنين المكاك التي تلقت ChAdTS هي فقط من إصيبت بالإتهاب الرئوي الخلالي الحاد بكل فصوص الرئة .
4 من الهامستر السوري تلقي كل منهم ChAdTS-S حيث 10^10 جزيئات فيروسية بالحقن العضلي وبيقابل ذلك 4 من الهامستر السوري تلقي كل منهم ChAdTS الناقل حيث 10^10 جزيئات فيروسية بالحقن العضلي وجمعت الامصال في الاسبوع 2 و 4 بعد التطعيم وقدرة الإرتباط ب RBD وقدرة التحييد ضد الفيروس بالنمط الكاذب قوية من أمصال الهامستر المحصن ب ChAdTS-S وتلقي الهامستر 10^5 من live SARS-CoV-2 من سلالة HKU-13 عن طريق الانف بالاسبوع 6 بعد التمنيع وتم مراقبة أوزان الهامسترات يوميا وحيث الهامسترات التي تلقت ChAdTS الناقل فقط إستمر وزنها بالإنخفاض حتي اليوم 4 بعد التحدي حيث تم القتل الرحيم وحصاد أنسجة الرئة وحيث فقط مع الهامسترات المحصنة ب ChAdTS-S لم يكشف عن بروتين N ل SARS-CoV-2 في الرئة عن طريق إرتباطه بجسم مضاد أحادي النسيلة وكمية الاحمال الفيروسية بانسجة الرئة ب qPCR كانت منخفضة بشكل كبير بالمقارنة مع الهامسترات التي تلقت ChAdTS الناقل فقط .
فئران BALB/c التي تلقت ChAdTS-S عبر الانف او بالحقن العضلي وجمعت الامصال بالأسبوع 36 بعد التطعيم وتم تحليل نشاط تحييد الفيروسات بالنمط الكاذب التي تحمل بروتين سبايك حيث من سلالة Wuhan-Hu-1 ومن سلالة UK501Y.V1 ومن سلالة SA501Y.V2 ومن سلالة BR501Y.V3 وحيث التحييد لم يتاثر إلي حد كبير برغم ان المتغيرات التي ظهرت لاول مرة بجنوب أفريقيا والبرازيل تحتوي علي ثلاثة طفرات ب RBD حيث K417 و E484 و N501 وبل بروتين سبايك من سلالة Wuhan-Hu-1 كان متوسط ID50 هو 626.9 التي تلقته بالحقن العضلي و 2207.5 التي تلقته عبر الانف ومن سلالة BR501Y.V3 كان متوسط ID50 هو 1076.9 مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S بالحقن العضلي و 2712.4 مع الفئران التي تلقت ChAdTS-S عبر الانف فكان اعلي ضد المتغير الذي إكتشف لاول مرة بالبرازيل ومع ذلك عندما تم تلقي المكاك الريسوسي ChAdTS-S عبر الانف وحيث جمعت الامصال بعد أسبوعين من التحصين او يتلقي المكاك الريسوسي ChAdTS-S بالحقن العضلي وحيث جمعت الامصال بالأسبوع الخامس بعد التطعيم وجدا ان نشاط تحييد الفيروسات بالنمط الكاذب التي تحمل بروتين سبايك من SA501Y.V2 و BR501Y.V3 إنخفض بمقدار 1 إلى 3.0 مرة عن ما كان مع الفيروسات بالنمط الكاذب التي تحمل S protein من Wuhan-Hu-1 لكن حدث زيادة قدرها 1 إلى 3.7 مرة عند تحييد الفيروسات بالنمط الكاذب التي تحمل بروتين سبايك من UK501Y.V1 الذي إكتشف لاول مرة بالمملكة المتحدة .
Phase I Clinical Trial of the Candidate Recombinant SARS-CoV-2 Vaccine (Chimpanzee Adenoviral Vector)
* تؤكد التجارب علي الحيوانات ان التطعيم بجرعة واحدة من ChAdTS-S بيؤدي إلي إحداث رد مناعي قوي ومستدام لبروتين سبايك الذي يمنع SARS-CoV-2 من الوصول للخلايا وهذا ماشجع علي بدء المرحلة الاولي من الإختبار السريري بتجنيد 30 من البالغين باعمار 18-59 و 30 من كبار السن باعمار 60 أو أكثر من 24 مايو 2021 لإجراء تقييم للمأمونية والرد المناعي الخلطي والخلوي عند تلقي جرعتين من ChAdTS-S وحيث 5×10^10 جزئيات فيروسية او البلاسيبو .
